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處理養殖廢水微生物制劑制備方法
2019-06-24
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本發明公開了一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，屬于環保領域。本發明以蛋白核小球藻、光合細菌為原料，對蛋白和小球藻進行馴化，使其具有較強得耐污、去除能力，小球藻能夠有效吸收養殖水體中的氮、磷營養物質，從而改善養殖環境，減小養殖密度的制約作用，將其與光合細菌混合，光合細菌在養殖水中直接消解有機質和硫化氫生長繁殖，水體得到了凈化，藻類在新陳代謝過程中通過微藻生長繁殖改變了廢水的物化性質，如廢水中pH值升高，會使磷酸鹽形成沉淀及NH3揮發，間接的去除了廢水中的氮磷。本發明解決了目前養殖廢水處理效率低，在水體中菌群分散群落的穩定性不高的問題。
權利要求書
1.一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，其特征在于，該制備方法包括如下步驟：
(1)取土壤按質量比1：150~200加入富集培養基，于180r/min、25~30℃培養，得培養物，取培養物按25%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養，得一級培養物，取一級培養物按15%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養物，得二級培養物，取二級培養物按10%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養物，得馴化培養物;
(2)取馴化培養物按質量比1：9加入生理鹽水混合，得混合液，取混合液稀釋至10-6的稀釋級，得稀釋液，取稀釋液涂布于純化培養基，于25~30℃培養，挑取菌徑最大的菌落劃線接種至純化培養基培養，重復劃線2~3次，得純化菌落，取純化菌落接種至富集培養基中，于25~30℃培養，離心，取沉淀，冷凍干燥，得干燥物，備用;
(3)取土壤按質量2：5加入蒸餾水，于95~100℃攪拌混合，冷卻至室溫，取上清液，取球藻培養基按質量比10：3加入上清液，滅菌，得滅菌物，取蛋白核小球藻按5%的接種量接種至滅菌物中，于25~28℃光照培養，得培養物a，取氯化銨按質量比5：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物，取培養物按質量比5：100~200：0.2~0.3加入滅菌物、混合添加物，于25~28℃光照培養，得初級馴化培養物，取氯化銨按質量比20：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物a，取初級馴化培養物按質量比6：150~250：0.4~0.6加入滅菌物、混合添加物a，于25~28℃光照培養，得二級馴化培養物，離心，取沉淀a;
(4)取沼澤紅假單胞菌按4~7%的接種量接種至活化培養基中，于28~33℃光照培養，得活化培養物，離心，取沉淀b，取沉淀a按質量比2：1加入沉淀b混合，干燥，粉碎，過100目篩，收集混合過篩顆粒;
(5)取步驟(2)備用的干燥物按質量比2：1 加入混合過篩顆粒混合，得混合物，取海藻酸鈉按質量比1：5~7加入去離子水，于60~80℃攪拌混合，再加入海藻酸鈉質量質量2~4倍的混合物，攪拌混合，得攪拌混合物，取質量分數為6%的氯化鈣溶液滴入至攪拌混合物，控制滴入時間20~30min，于25~30℃攪拌混合，靜置，擠壓造粒，得微生物制劑。
2.根據權利要求1所述的處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中富集培養基是按質量份數計，取1~4份硫酸銨、20~25份丁二酸鈉、2.5~4份磷酸氫二鉀、1~3份硫酸鎂、2~4份氯化鈉、0.003~0.006份硫酸鐵、0.003~0.007份硫酸錳、1000份水，121℃滅菌20min。
3.根據權利要求1所述的處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中純化培養基：富集培養基其他組分不變，加入20~25份瓊脂混合，即得。
4.根據權利要求1所述的處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中球藻培養基：按質量份數計，取10~15份硝酸鈉、3~5份磷酸氫二鉀、3~5份七水合硫酸鎂、1~3份二水氯化鈣、10~13份磷酸二氫鉀、1~3份氯化鈉、0.003~0.07份六水氯化鐵、2~4份乙二胺四乙酸鐵鈉、2~5份混合溶液、1000份蒸餾水，調節pH至6.8~7.2，121℃滅菌20min，即得。
5.根據權利要求4所述的處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，其特征在于，所述乙二胺四乙酸鐵鈉：取質量分數為20%的鹽酸按質量比10~20：1~3加入六水氯化鐵攪拌混合20~30min，得攪拌混合物，取攪拌混合物按質量比10：40~50：1加入EDTA二鈉、蒸餾水混合，即得乙二胺四乙酸鐵鈉;混合溶液：按質量份數計，取0.2~0.4份硼酸、0.1~0.3份四水合氯化錳、0.02~0.04份七水合硫酸鋅、0.003~0.005份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.005~0.008份CuSO4·5H2O、100份水混合，即得混合溶液。
6.根據權利要求1所述的處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中活化培養基：按質量份數計，取1~3份NH4 Cl、3~5份CH3COONa、20~25份MgCl2、0.1~0.3份CaCl2、0.4~0.8份KH2PO4 、0.3~0.5份K2HPO4、0.1~0.4份酵母膏、1000份蒸餾水，pH 7.2±0.1，121℃滅菌20min，即得。
說明書
一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法
技術領域
本發明屬于環保領域，具體涉及一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法。
背景技術
隨著我國畜禽養殖的飛速發展，我國的禽肉、豬肉、雞蛋產量持續增加，規模化養殖場能夠降低養殖場成本，增加經濟收入。但是規模化也造成了養殖場的糞尿過度集中，讓養殖場周圍環境承受著巨大壓力。養殖場廢水的污染形勢十分嚴峻，如何高效的處理養殖場廢水，避免廢水的肆意排放對水體和土壤造成的污染已經成為一個迫在眉睫的主要問題。
養殖場廢水主要來源：糞便淋出液、場地沖洗水和尿液。其特點是成分復雜，有機物濃度和氨氮濃度都很高，而且含有一定的抗生素和重金屬。現有的方法是對養殖用水進行簡單沉淀后再直接進行微生物凈化，然后直接送回池塘進行養殖，以微生物為主體的生物修復技術在水產養殖水質控制上的應用非常廣泛。養殖水體中存在著由多樣性的微生物構成的微生態系統，大多數情況下，養殖水體自然條件不能完全滿足生物修復的要求，或天然生物修復的效率和速度太低。投加外源微生物是優化微生態系統的重要途徑，它一方面可以調節生物降解微生態系統中微生物種群和群落的相互作用，另一方面可以提高微生態系統中微生物濃度和代謝活性。但在實際操作中凈化效果差強人意，在水體中菌群分散群落的穩定性不高。因此，提供一種處理養殖廢水的微生物制劑來解決上述問題尤為重要。
發明內容
本發明所要解決的技術問題：針對目前養殖廢水處理效率低，在水體中菌群分散群落的穩定性不高的問題，提供一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法。
為解決上述技術問題，本發明采用如下所述的技術方案是：
一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，其特征在于，該制備方法包括如下步驟：
(1)取土壤按質量比1：150~200加入富集培養基，于180r/min、25~30℃培養，得培養物，取培養物按25%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養，得一級培養物，取一級培養物按15%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養物，得二級培養物，取二級培養物按10%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養物，得馴化培養物;
(2)取馴化培養物按質量比1：9加入生理鹽水混合，得混合液，取混合液稀釋至10-6的稀釋級，得稀釋液，取稀釋液涂布于純化培養基，于25~30℃培養，挑取菌徑最大的菌落劃線接種至純化培養基培養，重復劃線2~3次，得純化菌落，取純化菌落接種至富集培養基中，于25~30℃培養，離心，取沉淀，冷凍干燥，得干燥物，備用;
(3)取土壤按質量2：5加入蒸餾水，于95~100℃攪拌混合，冷卻至室溫，取上清液，取球藻培養基按質量比10：3加入上清液，滅菌，得滅菌物，取蛋白核小球藻按5%的接種量接種至滅菌物中，于25~28℃光照培養，得培養物a，取氯化銨按質量比5：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物，取培養物按質量比5：100~200：0.2~0.3加入滅菌物、混合添加物，于25~28℃光照培養，得初級馴化培養物，取氯化銨按質量比20：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物a，取初級馴化培養物按質量比6：150~250：0.4~0.6加入滅菌物、混合添加物a，于25~28℃光照培養，得二級馴化培養物，離心，取沉淀a;
(4)取沼澤紅假單胞菌按4~7%的接種量接種至活化培養基中，于28~33℃光照培養，得活化培養物，離心，取沉淀b，取沉淀a按質量比2：1加入沉淀b混合，干燥，粉碎，過100目篩，收集混合過篩顆粒;
(5)取步驟(2)備用的干燥物按質量比2：1 加入混合過篩顆粒混合，得混合物，取海藻酸鈉按質量比1：5~7加入去離子水，于60~80℃攪拌混合，再加入海藻酸鈉質量質量2~4倍的混合物，攪拌混合，得攪拌混合物，取質量分數為6%的氯化鈣溶液滴入至攪拌混合物，控制滴入時間20~30min，于25~30℃攪拌混合，靜置，擠壓造粒，得微生物制劑。
所述步驟(1)中富集培養基是按質量份數計，取1~4份硫酸銨、20~25份丁二酸鈉、2.5~4份磷酸氫二鉀、1~3份硫酸鎂、2~4份氯化鈉、0.003~0.006份硫酸鐵、0.003~0.007份硫酸錳、1000份水，121℃滅菌20min。
所述步驟(2)中純化培養基：富集培養基其他組分不變，加入20~25份瓊脂混合，即得。
所述步驟(3)中球藻培養基：按質量份數計，取10~15份硝酸鈉、3~5份磷酸氫二鉀、3~5份七水合硫酸鎂、1~3份二水氯化鈣、10~13份磷酸二氫鉀、1~3份氯化鈉、0.003~0.07份六水氯化鐵、2~4份乙二胺四乙酸鐵鈉、2~5份混合溶液、1000份蒸餾水，調節pH至6.8~7.2，121℃滅菌20min，即得。
所述乙二胺四乙酸鐵鈉：取質量分數為20%的鹽酸按質量比10~20：1~3加入六水氯化鐵攪拌混合20~30min，得攪拌混合物，取攪拌混合物按質量比10：40~50：1加入EDTA二鈉、蒸餾水混合，即得乙二胺四乙酸鐵鈉;混合溶液：按質量份數計，取0.2~0.4份硼酸、0.1~0.3份四水合氯化錳、0.02~0.04份七水合硫酸鋅、0.003~0.005份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.005~0.008份CuSO4·5H2O、100份水混合，即得混合溶液。
所述步驟(4)中活化培養基：按質量份數計，取1~3份NH4 Cl、3~5份CH3COONa、20~25份MgCl2、0.1~0.3份CaCl2、0.4~0.8份KH2PO4 、0.3~0.5份K2HPO4、0.1~0.4份酵母膏、1000份蒸餾水，pH 7.2±0.1，121℃滅菌20min，即得。
本發明與其他方法相比，有益技術效果是：
(1)本發明微生物在有氧的條件下將氨氮氧化為亞硝酸鹽氮，再進一步氧化為硝酸鹽氮，而自養硝化菌增長速度比較緩慢，對環境條件要求嚴格，其最佳溫度為 35~42℃，在低溫時(尤其是冬季)硝化速率低，硝化過程需要較高的溶解氧濃度(>3 mg/L)，中性偏堿(7.0~8.0)的pH條件以及非常低的C/N值，為了提高硝化速率與自養硝化菌相比，異養硝化菌具有生長速度快，環境適應能力強等特點，從土壤中篩選具有高脫氮能力的異養硝化菌，加入丁二酸鈉為唯一碳源，加入培養過程中廢水中的銨鹽沒有被氧化成亞硝酸鹽和硝酸鹽，而是大部分被轉化成了菌體內的胞內氮，在實際的污水處理過程中，這部分的氮將轉移至剩余污泥中，從而提高了剩余污泥中氮的含量及肥效，有利于后續通過堆肥等過程將養殖場廢水處理產生的污泥開發成作物肥料;
(2)本發明以蛋白核小球藻、光合細菌為原料，對蛋白核小球藻進行馴化，使其具有較強的耐污、去污能力，小球藻能夠有效吸收養殖水體中的氮、磷營養物質，從而起到改善養殖環境，減小養殖密度的制約作用，將其與光合細菌混合，光合細菌在養殖水中直接消解有機質和硫化氫生長繁殖，水體得到了凈化，藻類在新陳代謝過程中通過微藻生長繁殖改變了廢水的物化性質，如廢水中pH值升高，會使磷酸鹽形成沉淀及NH3揮發，間接的去除了廢水中的氮磷，微藻通過細胞壁和細胞膜上的脂質將大量有機物吸收，然后將其降解為小分子物質，這些物質可以被周圍的細菌利用，細菌也會向周圍環境釋放酶類、維生素、糖肽類物質可以促進藻類的生長，治理養殖廢水時，通過細菌的作用，含碳有機物分解成為CO2和H2O，含磷有機物消解成為正磷酸鹽，含氮有機物氨化或硝化成為硝酸鹽、亞硝酸鹽和氨氮，這些小分子物質為藻類提供了碳、氮和磷，藻類通過新陳代謝將這些物質轉化為自身的細胞成分，藻類通過光合作用釋放出氧氣，使水環境中的氧含量升高，又為某些好氧菌的新陳代謝提供了良好的水環境;
(3)本發明利用海藻酸鈉、氯化鈣藻菌細胞球粒進行固定化，對氮磷的去除效果較好，除了溶液揮發和包埋載體的吸附作用之外，主要是因為球粒內部的多孔和縫隙結構，為微藻和細菌提供了良好的生長繁殖條件為藻菌和底物的接觸提供了較大表面積，水產養殖廢水與球粒內部的微藻和菌類細胞接觸面積越大，各種營養鹽更容易進入固定化藻菌細胞球粒的內部，固定化使藻菌的濃度大大增加，對氮磷的去除效率也大大提高了，同時也具有緩釋性能，延長了微生物制劑處理養殖廢水的效果。
具體實施方式
土壤：取自浙江省舟山市長峙島馬鞍村農田土壤。
富集培養基：按質量份數計，取1~4份硫酸銨、20~25份丁二酸鈉、2.5~4份磷酸氫二鉀、1~3份硫酸鎂、2~4份氯化鈉、0.003~0.006份硫酸鐵、0.003~0.007份硫酸錳、1000份水，121℃滅菌20min。
純化培養基：富集培養基其他組分不變，加入20~25份瓊脂混合，即得。
球藻培養基：按質量份數計，取10~15份硝酸鈉、3~5份磷酸氫二鉀、3~5份七水合硫酸鎂、1~3份二水氯化鈣、10~13份磷酸二氫鉀、1~3份氯化鈉、0.003~0.07份六水氯化鐵、2~4份乙二胺四乙酸鐵鈉、2~5份混合溶液、1000份蒸餾水，調節pH至6.8~7.2，121℃滅菌20min，即得。
乙二胺四乙酸鐵鈉：取質量分數為20%的鹽酸按質量比10~20：1~3加入六水氯化鐵攪拌混合20~30min，得攪拌混合物，取攪拌混合物按質量比10：40~50：1加入EDTA二鈉、蒸餾水混合，即得乙二胺四乙酸鐵鈉。
混合溶液：按質量份數計，取0.2~0.4份硼酸、0.1~0.3份四水合氯化錳、0.02~0.04份七水合硫酸鋅、0.003~0.005份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.005~0.008份CuSO4·5H2O、100份水混合，即得混合溶液。
活化培養基：按質量份數計，取1~3份NH4 Cl、3~5份CH3COONa、20~25份MgCl2、0.1~0.3份CaCl2、0.4~0.8份KH2PO4 、0.3~0.5份K2HPO4、0.1~0.4份酵母膏、1000份蒸餾水，pH 7.2±0.1，121℃滅菌20min，即得。
一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，該制備方法包括如下步驟：
(1)取土壤按質量比1：150~200加入富集培養基，于180r/min、25~30℃培養2~3天，得培養物，取培養物按25%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養2~3天，得一級培養物，取一級培養物按15%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養物2~3天，得二級培養物，取二級培養物按10%的接種量接種至富集培養基中，于25~30℃培養物2~3天，得馴化培養物;
(2)取馴化培養物按質量比1：9加入生理鹽水混合，得混合液，取混合液稀釋至10-6的稀釋級，得稀釋液，取稀釋液涂布于純化培養基，于25~30℃培養2~3天，挑取菌徑最大的菌落劃線接種至純化培養基培養，重復劃線2~3次，得純化菌落，取純化菌落接種至富集培養基中，于25~30℃培養18~24h，離心，取沉淀，冷凍干燥，得干燥物，備用;
(3)取土壤按質量2：5加入蒸餾水，于95~100℃攪拌混合2~3h，冷卻至室溫，取上清液，取球藻培養基按質量比10：3加入上清液，121℃滅菌20min，得滅菌物，取蛋白核小球藻按5%的接種量接種至滅菌物中，于25~28℃光照培養1~2天，得培養物a，取氯化銨按質量比5：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物，取培養物按質量比5：100~200：0.2~0.3加入滅菌物、混合添加物，于25~28℃光照培養1~2天，得初級馴化培養物，取氯化銨按質量比20：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物a，取初級馴化培養物按質量比6：150~250：0.4~0.6加入滅菌物、混合添加物a，于25~28℃光照培養1~2天，得二級馴化培養物，離心，取沉淀a;
(4)取沼澤紅假單胞菌按4~7%的接種量接種至活化培養基中，于28~33℃光照培養2~3天，得活化培養物，離心，取沉淀b，取沉淀a按質量比2：1加入沉淀b混合，干燥，粉碎，過100目篩，收集混合過篩顆粒;
(5)取步驟(2)備用的干燥物按質量比2：1 加入混合過篩顆粒混合，得混合物，取海藻酸鈉按質量比1：5~7加入去離子水，于60~80℃攪拌混合30~40min，再加入海藻酸鈉質量質量2~4倍的混合物，攪拌混合1~2h，得攪拌混合物，取質量分數為6%的氯化鈣溶液滴入至攪拌混合物，控制滴入時間20~30min，于25~30℃攪拌混合30~40min，靜置1~2h，擠壓造粒，得微生物制劑。
土壤：取自浙江省舟山市長峙島馬鞍村農田土壤。
富集培養基：按質量份數計，取1份硫酸銨、20份丁二酸鈉、2.5份磷酸氫二鉀、1份硫酸鎂、2份氯化鈉、0.003份硫酸鐵、0.003份硫酸錳、1000份水，121℃滅菌20min。
純化培養基：富集培養基其他組分不變，加入20份瓊脂混合，即得。
球藻培養基：按質量份數計，取10份硝酸鈉、3份磷酸氫二鉀、3份七水合硫酸鎂、1份二水氯化鈣、10份磷酸二氫鉀、1份氯化鈉、0.003份六水氯化鐵、2份乙二胺四乙酸鐵鈉、2份混合溶液、1000份蒸餾水，調節pH至6.8，121℃滅菌20min，即得。
乙二胺四乙酸鐵鈉：取質量分數為20%的鹽酸按質量比10：1加入六水氯化鐵攪拌混合20min，得攪拌混合物，取攪拌混合物按質量比10：40：1加入EDTA二鈉、蒸餾水混合，即得乙二胺四乙酸鐵鈉。
混合溶液：按質量份數計，取0.2份硼酸、0.1份四水合氯化錳、0.02份七水合硫酸鋅、0.003份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.005份CuSO4·5H2O、100份水混合，即得混合溶液。
活化培養基：按質量份數計，取1份NH4 Cl、3份CH3COONa、20份MgCl2、0.1份CaCl2、0.4份KH2PO4 、0.3份K2HPO4、0.1份酵母膏、1000份蒸餾水，pH 7.1，121℃滅菌20min，即得。
一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，該制備方法包括如下步驟：
(1)取土壤按質量比1：150加入富集培養基，于180r/min、25℃培養2天，得培養物，取培養物按25%的接種量接種至富集培養基中，于25℃培養2天，得一級培養物，取一級培養物按15%的接種量接種至富集培養基中，于25℃培養物2天，得二級培養物，取二級培養物按10%的接種量接種至富集培養基中，于25℃培養物2天，得馴化培養物;
(2)取馴化培養物按質量比1：9加入生理鹽水混合，得混合液，取混合液稀釋至10-6的稀釋級，得稀釋液，取稀釋液涂布于純化培養基，于25℃培養2天，挑取菌徑最大的菌落劃線接種至純化培養基培養，重復劃線2次，得純化菌落，取純化菌落接種至富集培養基中，于25℃培養18h，離心，取沉淀，冷凍干燥，得干燥物，備用;
(3)取土壤按質量2：5加入蒸餾水，于95℃攪拌混合2h，冷卻至室溫，取上清液，取球藻培養基按質量比10：3加入上清液，121℃滅菌20min，得滅菌物，取蛋白核小球藻按5%的接種量接種至滅菌物中，于25℃光照培養1天，得培養物a，取氯化銨按質量比5：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物，取培養物按質量比5：100：0.2加入滅菌物、混合添加物，于25℃光照培養1天，得初級馴化培養物，取氯化銨按質量比20：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物a，取初級馴化培養物按質量比6：150：0.4加入滅菌物、混合添加物a，于25℃光照培養1天，得二級馴化培養物，離心，取沉淀a;
(4)取沼澤紅假單胞菌按4%的接種量接種至活化培養基中，于28℃光照培養2天，得活化培養物，離心，取沉淀b，取沉淀a按質量比2：1加入沉淀b混合，干燥，粉碎，過100目篩，收集混合過篩顆粒;
(5)取步驟(2)備用的干燥物按質量比2：1 加入混合過篩顆粒混合，得混合物，取海藻酸鈉按質量比1：5加入去離子水，于60℃攪拌混合30min，再加入海藻酸鈉質量質量2倍的混合物，攪拌混合1h，得攪拌混合物，取質量分數為6%的氯化鈣溶液滴入至攪拌混合物，控制滴入時間20min，于25℃攪拌混合30min，靜置1h，擠壓造粒，得微生物制劑。
土壤：取自浙江省舟山市長峙島馬鞍村農田土壤。
富集培養基：按質量份數計，取4份硫酸銨、25份丁二酸鈉、4份磷酸氫二鉀、3份硫酸鎂、4份氯化鈉、0.006份硫酸鐵、0.007份硫酸錳、1000份水，121℃滅菌20min。
純化培養基：富集培養基其他組分不變，加入25份瓊脂混合，即得。
球藻培養基：按質量份數計，取15份硝酸鈉、5份磷酸氫二鉀、5份七水合硫酸鎂、3份二水氯化鈣、13份磷酸二氫鉀、3份氯化鈉、0.07份六水氯化鐵、4份乙二胺四乙酸鐵鈉、5份混合溶液、1000份蒸餾水，調節pH至7.2，121℃滅菌20min，即得。
乙二胺四乙酸鐵鈉：取質量分數為20%的鹽酸按質量比20：3加入六水氯化鐵攪拌混合30min，得攪拌混合物，取攪拌混合物按質量比10：50：1加入EDTA二鈉、蒸餾水混合，即得乙二胺四乙酸鐵鈉。
混合溶液：按質量份數計，取0.4份硼酸、0.3份四水合氯化錳、0.04份七水合硫酸鋅、0.005份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.008份CuSO4·5H2O、100份水混合，即得混合溶液。
活化培養基：按質量份數計，取3份NH4 Cl、5份CH3COONa、25份MgCl2、0.3份CaCl2、0.8份KH2PO4 、0.5份K2HPO4、0.4份酵母膏、1000份蒸餾水，pH 7.3，121℃滅菌20min，即得。
一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，該制備方法包括如下步驟：
(1)取土壤按質量比1：200加入富集培養基，于180r/min、30℃培養3天，得培養物，取培養物按25%的接種量接種至富集培養基中，于30℃培養3天，得一級培養物，取一級培養物按15%的接種量接種至富集培養基中，于30℃培養物3天，得二級培養物，取二級培養物按10%的接種量接種至富集培養基中，于30℃培養物3天，得馴化培養物;
(2)取馴化培養物按質量比1：9加入生理鹽水混合，得混合液，取混合液稀釋至10-6的稀釋級，得稀釋液，取稀釋液涂布于純化培養基，于30℃培養3天，挑取菌徑最大的菌落劃線接種至純化培養基培養，重復劃線3次，得純化菌落，取純化菌落接種至富集培養基中，于30℃培養24h，離心，取沉淀，冷凍干燥，得干燥物，備用;
(3)取土壤按質量2：5加入蒸餾水，于100℃攪拌混合3h，冷卻至室溫，取上清液，取球藻培養基按質量比10：3加入上清液，121℃滅菌20min，得滅菌物，取蛋白核小球藻按5%的接種量接種至滅菌物中，于28℃光照培養2天，得培養物a，取氯化銨按質量比5：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物，取培養物按質量比5：200：0.3加入滅菌物、混合添加物，于28℃光照培養2天，得初級馴化培養物，取氯化銨按質量比20：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物a，取初級馴化培養物按質量比6：250：0.6加入滅菌物、混合添加物a，于28℃光照培養2天，得二級馴化培養物，離心，取沉淀a;
(4)取沼澤紅假單胞菌按7%的接種量接種至活化培養基中，于33℃光照培養3天，得活化培養物，離心，取沉淀b，取沉淀a按質量比2：1加入沉淀b混合，干燥，粉碎，過100目篩，收集混合過篩顆粒;
(5)取步驟(2)備用的干燥物按質量比2：1 加入混合過篩顆粒混合，得混合物，取海藻酸鈉按質量比1：7加入去離子水，于80℃攪拌混合40min，再加入海藻酸鈉質量質量4倍的混合物，攪拌混合2h，得攪拌混合物，取質量分數為6%的氯化鈣溶液滴入至攪拌混合物，控制滴入時間30min，于30℃攪拌混合40min，靜置2h，擠壓造粒，得微生物制劑。
土壤：取自浙江省舟山市長峙島馬鞍村農田土壤。
富集培養基：按質量份數計，取3份硫酸銨、23份丁二酸鈉、3份磷酸氫二鉀、2份硫酸鎂、3份氯化鈉、0.004份硫酸鐵、0.005份硫酸錳、1000份水，121℃滅菌20min。
純化培養基：富集培養基其他組分不變，加入23份瓊脂混合，即得。
球藻培養基：按質量份數計，取13份硝酸鈉、4份磷酸氫二鉀、4份七水合硫酸鎂、2份二水氯化鈣、12份磷酸二氫鉀、2份氯化鈉、0.05份六水氯化鐵、3份乙二胺四乙酸鐵鈉、3份混合溶液、1000份蒸餾水，調節pH至7，121℃滅菌20min，即得。
乙二胺四乙酸鐵鈉：取質量分數為20%的鹽酸按質量比15：2加入六水氯化鐵攪拌混合25min，得攪拌混合物，取攪拌混合物按質量比10：45：1加入EDTA二鈉、蒸餾水混合，即得乙二胺四乙酸鐵鈉。
混合溶液：按質量份數計，取0.3份硼酸、0.2份四水合氯化錳、0.03份七水合硫酸鋅、0.004份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.007份CuSO4·5H2O、100份水混合，即得混合溶液。
活化培養基：按質量份數計，取2份NH4 Cl、4份CH3COONa、23份MgCl2、0.2份CaCl2、0.6份KH2PO4 、0.4份K2HPO4、0.3份酵母膏、1000份蒸餾水，pH 7.2，121℃滅菌20min，即得。
一種處理養殖廢水的微生物制劑的制備方法，該制備方法包括如下步驟：
(1)取土壤按質量比1：175加入富集培養基，于180r/min、27℃培養2天，得培養物，取培養物按25%的接種量接種至富集培養基中，于27℃培養2天，得一級培養物，取一級培養物按15%的接種量接種至富集培養基中，于27℃培養物2天，得二級培養物，取二級培養物按10%的接種量接種至富集培養基中，于27℃培養物2天，得馴化培養物;
(2)取馴化培養物按質量比1：9加入生理鹽水混合，得混合液，取混合液稀釋至10-6的稀釋級，得稀釋液，取稀釋液涂布于純化培養基，于27℃培養2天，挑取菌徑最大的菌落劃線接種至純化培養基培養，重復劃線2次，得純化菌落，取純化菌落接種至富集培養基中，于27℃培養21h，離心，取沉淀，冷凍干燥，得干燥物，備用;
(3)取土壤按質量2：5加入蒸餾水，于97℃攪拌混合2h，冷卻至室溫，取上清液，取球藻培養基按質量比10：3加入上清液，121℃滅菌20min，得滅菌物，取蛋白核小球藻按5%的接種量接種至滅菌物中，于27℃光照培養1天，得培養物a，取氯化銨按質量比5：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物，取培養物按質量比5：150：0.2加入滅菌物、混合添加物，于27℃光照培養1天，得初級馴化培養物，取氯化銨按質量比20：1：5加入硝酸鈉、磷酸氫二鉀混合，得混合添加物a，取初級馴化培養物按質量比6：200：0.5加入滅菌物、混合添加物a，于27℃光照培養1天，得二級馴化培養物，離心，取沉淀a;
(4)取沼澤紅假單胞菌按5%的接種量接種至活化培養基中，于30℃光照培養2天，得活化培養物，離心，取沉淀b，取沉淀a按質量比2：1加入沉淀b混合，干燥，粉碎，過100目篩，收集混合過篩顆粒;
(5)取步驟(2)備用的干燥物按質量比2：1 加入混合過篩顆粒混合，得混合物，取海藻酸鈉按質量比1：6加入去離子水，于70℃攪拌混合35min，再加入海藻酸鈉質量質量3倍的混合物，攪拌混合1h，得攪拌混合物，取質量分數為6%的氯化鈣溶液滴入至攪拌混合物，控制滴入時間25min，于27℃攪拌混合35min，靜置1h，擠壓造粒，得微生物制劑。
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